维生素B6检测试剂盒（可见分光光度法）
产品货号：BA
产品规格：50管/24样
产品简介：
维生素B6（VitaminB6）又称吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在体内以磷酸酯的形式存在，是一种水溶性维生素，肉类、全谷类、蔬菜和坚果类中含量较高。在机体中参与多种蛋白质和氨基酸的代谢，对生物体具有极其重要的作用。
VB6与4-氨基安替比林在强氧化剂作用下生成稳定的黄色化合物，在nm有特征吸收峰。
技术指标：
最低检出限：0.mg/mL
线性范围：0.-1mg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
产品组成：
溶液的配制：
1.提取液：内含不溶物，使用前摇匀；
2.试剂四：临用前加入20mL蒸馏水混匀，4℃保存一周，如果一次性用不完，可分装于-20℃保存待用；
3.标准品：10mg维生素B6，临用前加入1mL试剂一，配成10mg/mL的标准液。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、蒸馏水。
操作步骤（仅供参考）：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
组织：将样本磨碎，按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入0.6mL提取液）加入提取液，60℃浸提30min，加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，rpm离心10min，取上清测定（动物组织及其他蛋白含量较高的样本建议离心20-30分钟或反复离心2-3次至上清无混浊）。
细胞或细菌：按照细胞数量（个）：提取液体积（mL）为~：1的比例（建议万细胞加入0.6mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，rpm离心10min，取上清测定。
液体：直接检测。
二、测定步骤
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
2.将10mg/mL标准液用试剂一稀释为1、0.5、0.25、0.、0.、0.03、0.mg/mL的标准溶液备用。
3.操作表：在1.5mL离心管中依次加入下列试剂：
三、维生素B6含量计算
1.标准曲线的绘制：
以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA带入方程得到x（mg/mL）。
2.维生素B6含量的计算：
（1）按蛋白浓度计算：VB6（mg/mgprot）=x×V提取÷（V提取×Cpr）=x÷Cpr
（2）按样本质量计算：VB6（mg/g质量）=x×V提取÷W=x÷W
（3）按照细胞数量计算：VB6（mg/cell）=x×V提取÷细胞数量（万个）=x÷细胞数量（万个）
（4）按液体体积计算：VB6（mg/mL）=x×V样÷V样=x
V提取：样本提取体积，1mL；V样：加入的样本体积，0.2mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
注意事项：
1.如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
2.蛋白浓度较高的样本，比如动物组织、豆类种子等，若显色完成后有沉淀产生，将样本稀释后再测定，在计算公式中乘以稀释倍数。
3.显色完成后立即进行测定，尽量保证反应时间一致。