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TUhjnbcbe - 2023/1/15 19:51:00

Aegilopsuniaristata(NN)是小麦的近缘植物之一,LMW-N13编码一个结构特殊的LMW-GS,基因ORF全长bp,编码的蛋白分子量比小麦中的1Dy12略小,是目前报道的分子量最大的LMW-GS(图1)。

图1a.LMW-N13在PI中的SDS-PAGE分析b.LMW-N13在PI中的扩增

氨基酸序列分析发现,LMW-N13属于I型LMW-GS,多个位点的序列插入导致了它较大的分子量,另外,其含有一个额外的半胱氨酸残基,因此我们推测,LMW-N13对面粉品质能够起到正向作用(图2)。

图2LMW-N13与8个已发表的I型LMW-GSs进行多序列比对

为了研究LMW-N13对面粉品质的贡献,我们通过遗传转化,获得了过表达LMW-N13的转基因材料。通过SDS-PAGE和westernblot验证,得到了三个转基因株系。通过在实验室快速加代的方式,我们用了大约一年半的时间,从T1收获了T3,在当年的10月份种植在田间(图3)。

图3LMW-N13在转基因株系中的SDS-PAGE和Westernblot验证

品质性状分析表明,转基因材料的谷蛋白聚合体含量,籽粒总蛋白含量,面粉稳定时间以及湿面筋含量都得到了显著的提高(图4)。

图4转基因株系和野生型中的谷蛋白高分子积累,蛋白含量,面团稳定性,湿面筋含量分析

另外,转基因小麦中分子间二硫键含量的提高,是促进转基因材料面粉品质的重要原因(图5)。

图5野生型和转基因株系面粉中游离硫醇(a)和二硫键(b)的比较

该研究包括基因克隆和功能分析两部分,于年和年分别发表在JournalofGenetics和FoodChemistry上(Tangetal.Cloningandcharacterizationofanovellow-molecular-weightgluteninsubunitgenewithanunusualmolecularstructureofAegilopsuniaristata;Duetal.Low-molecular-weightgluteninsubunitLMW-N13improvesdoughqualityoftransgenicwheat)。此项研究由贵州师范大学和山东农业大学共同完成,感谢国家自然科学基金和贵州省自然科学基金的资助,同时感谢贵州大学农学院任明见教授提供的帮助。

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