导读
外泌体RNA（exosomal，exRNA）能够介导细胞间通讯，并作为生物标志物和治疗剂应用于临床，在癌症研究展现出广阔前景。
近年来，肿瘤循环miRNA标志物的研究如火如荼，但由于外泌体mRNA（exosomalmessengerRNA，emRNA）存在形式的不确定性，增加了emRNA研究的难度，使得目前emRNA的报道知之甚少。
去年，医院在《MolecularCancer》IF41.44发表“
CirculatingexosomalmRNAprofilingidentifiesnovelsignaturesforthedetectionofprostatecancer”
，通过mRNA-seq对前列腺癌（Prostatecancer，Pca）诊断的新型非侵入性生物标志物。研究建立了一种新的emRNA研究策略，为液体活检相关emRNA表达谱进行检测，并最终确定6个emRNA作为用于PCa诊断的新型非侵入性生物标志物。研究建立了一种新的emRNA研究策略，为液体活检研究提供了一种新的思路。
（DOI:10./s---z）
研究策略
图1研究思路
样本类型：血浆外泌体、组织
检测平台：mRNA-seq
检测策略：
1、IGV比对组织和外周血外泌体mRNA-seq测序数据中reads的覆盖度，确定变异丰度；
2、针对候选mRNA外显子区设计多对引物，挑选RT-PCR验证中具有特异性条带的引物，由于后续emRNA靶向验证引物。
结果展示
图2emRNA验证流程（左）和诊断模型ROC曲线（右）
研究通过mRNA-seq检测了31例PCa患者和17例良性前列腺增生（BHP）个体外周血来源的emRNA表达情况。与组织mRNA表达谱相比，两组数据显示出良好的一致性。
研究使用mRNA-seq平台对emRNA前期筛选发现，与BHP组相比，PCa组中共找到个显著上调的emRNA（p0.05，FC2），经LASSO回归进一步筛选共得到9个emRNA，以及另4个上调的emRNA，用于后续验证。
使用qPR-PCR对上述得到的13个emRNA扩大样本验证。首先，在10对PCa和BHP样本中对13个emRNA进行qRT-PCR初步验证，排除了3个与RNA-seq不一致的emRNA（TXK、ATM和TOX4）。接着，在76例PCa患者和84例BHP样本中对剩余10个emRNA进行进一步qRT-PCR验证，结果发现其中有4个emRNA（STK4、GRK5、RASSF5和FAMB）的表达在两组中并未检测到差异，进一步排除。
最后，对剩余6个emRNA（CDC42、IL32、MAX、NCF2、PDGFA和SRSF2）在例PCa患者和例BHP样本以及30例正常人中进一步验证，结果发现这6个emRNA无论相对于BHP组还是正常组，PCa组中表达均显著上调（p=10-4）。使用多因素逻辑回归对6个emRNA联合建模，该模型区分PCa患者和正常人（AUC=0.）以及PCa患者和BPH患者（AUC=0.）都展示出优异的诊断性能。
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公司简介
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